Allgemeine Beschreibung
Actin, ein hochkonserviertes Protein, ist ein Hauptbestandteil sowohl des Zytoskeletts als auch der kontraktilen Strukturen in allen Zelltypen. Es variiert in seiner Menge, was mit der Art der Differenzierung und dem funktionellen Zustand von Zellen und Geweben zusammenhängt. Aktin kommt in zwei verschiedenen Aggregatzuständen vor, dem globulären oder dem fibrillären Zustand, und es gibt mindestens sechs verschiedene Isoformen in Wirbeltieren. Die Aktine weisen eine Sequenzhomologie von über 90 % auf, aber jede Isoform hat eine einzigartige NH2-terminale Sequenz.
Das ACTA1 (Aktin, α 1) Gen ist auf dem menschlichen Chromosom 1q42.13 kartiert. Das Gen kodiert für Aktin 1, eine dünne Filamentkomponente des Skelettmuskels.
Im Immunoblotting lokalisiert das Produkt Aktin in vielen Spezies, vom menschlichen Skelettmuskel bis zu Amöben. Das Produkt erkennt die 42 kDa Aktin-Bande bei Immunoblotting-Techniken in menschlichen oder tierischen Gewebeextrakten.
Spezifität
Anti-Actin färbt spezifisch typische Stressfasern in kultivierten Hühnerfibroblasten.
Immunogen
Das C-terminale Actin-Fragment, das an ein multiples Antigen-Peptid (MAP) gebunden ist.
Anwendung
Kann zur Untersuchung der Aktinstruktur und -funktion und zur Untersuchung der Bindungsstellen von Aktin-bindenden Proteinen verwendet werden.
Der Kaninchen-Anti-Actin-Antikörper kann für Western-Blot-Assays verwendet werden. Der Antikörper kann auch für Immunhistochemie (1:25, unter Verwendung menschlicher oder tierischer Gewebeschnitte) und indirekte Immunfluoreszenz (1:40, unter Verwendung von Hühnerfibroblasten) verwendet werden.
Zur Untersuchung von Aktinstruktur und -funktion und zur Untersuchung von Bindungsstellen aktinbindender Proteine. Proteinlysate, die aus embryonalem Maus-Gliedmaßengewebe gewonnen wurden, wurden mittels Western Blot unter Verwendung von Aktin als Ladekontrolle analysiert. Actin wurde mit einem Kaninchen-Anti-Actin bei 1:8000 nachgewiesen. Das mit einem Kaninchen-Anti-Actin-Antikörper detektierte Actin wurde als Ladekontrolle für MCF7-Zelllysate verwendet. Actin wurde bei 42 kDa detektiert.
Zur Untersuchung der Aktin-Struktur und -Funktion sowie zur Untersuchung der Bindungsstellen von Aktin-bindenden Proteinen. Proteinlysate, die aus embryonalem Gliedmaßengewebe von Mäusen gewonnen wurden, wurden mittels Western Blot unter Verwendung von Actin als Ladekontrolle analysiert. Actin wurde mit einem Kaninchen-Anti-Actin bei 1:8000 nachgewiesen. Actin, das mit einem Kaninchen-Anti-Actin-Antikörper detektiert wurde, diente als Ladekontrolle für MCF7-Zell-Lysate. Actin wurde bei 42 kDa nachgewiesen.
Physikalische Form
Lösung in 0,01 M phosphatgepufferter Kochsalzlösung, pH 7,4, mit 1% Rinderserumalbumin und 15 mM Natriumazid als Konservierungsmittel.
Lagerung und Stabilität
Bei kontinuierlicher Anwendung bei 2-8 °C bis zu einem Monat lagern.
Für eine längere Lagerung kann die Lösung in Arbeitsaliquots eingefroren werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen oder die Lagerung in „frostfreien“ Gefrierschränken wird nicht empfohlen. Falls bei längerer Lagerung eine leichte Trübung auftritt, klären Sie die Lösung vor Gebrauch durch Zentrifugation.
Haftungsausschluss
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Biochemische/physiologische Wirkungen
Actin ist ein Zytoskelettprotein, das die Zellmotilität, Sekretion, Phagozytose und Zytokinese reguliert. Das NH2-terminale Ende von Aktin kann als Antigen fungieren. Dieses Terminal kann auch Aktin-Interaktionen modulieren und kann mit Proteinen wie Myosin assoziieren. Aktin-Protein ist essentiell für die Bildung reifer Thrombozyten.
Mutationen in ACTA1 (Aktin, α 1) sind bekannt dafür, eine Dünnfilament-Myopathie wie die nemaline Myopathie, kongenitale Myopathie, Aktin-Myopathie, intranukleäre Stäbchen-Myopathie, Cap-Myopathie und Core-Myopathie zu verursachen. Eine Hochregulierung des Gens wird bei orthotoper Lebertransplantation ohne vorherige Anzeichen einer autoimmunen Lebererkrankung beobachtet. Das kodierte Protein Aktin bildet ein Netzwerk von Filamenten und ist für die Form der Zelle verantwortlich. Es sorgt für die zelluläre Festigkeit und fördert die aktive Bewegung der Zelle.
Weitere Hinweise
Eine Anleitung zur Auswahl von Actin-Antikörpern finden Sie unter www.sigmaaldrich.com/actin.