Description générale
L’actine, une protéine hautement conservée, est un composant majeur des structures cytosquelettiques et contractiles dans tous les types de cellules. Sa quantité varie, étant liée au type de différenciation et à l’état fonctionnel des cellules et des tissus. L’actine se présente sous deux formes d’agrégation différentes, l’état globulaire ou l’état fibrillaire, et au moins six isoformes distinctes sont présentes chez les vertébrés. Les actines présentent une homologie de séquence de plus de 90%, mais chaque isoforme possède une séquence NH2-terminale unique.
Le gène ACTA1 (actine, α 1) est cartographié sur le chromosome humain 1q42.13. Le gène code pour l’actine 1, un composant de filament mince du muscle squelettique.
En immunoblotting, le produit localise l’actine dans de nombreuses espèces allant du muscle squelettique humain aux amibes. Le produit reconnaît la bande d’actine de 42 kDa en utilisant des techniques d’immunoblotting dans des extraits de tissus humains ou animaux.
Spécificité
L’anti actine colore spécifiquement les fibres de stress typiques dans les fibroblastes de poulet en culture.
Immunogène
Le fragment d’actine C-terminal attaché à un squelette de peptide antigénique multiple (MAP).
Application
Peut être utilisé pour étudier la structure et la fonction de l’actine et pour sonder les sites de liaison des protéines de liaison à l’actine.
L’anticorps anti-actine de lapin peut être utilisé pour des essais de western blot. L’anticorps peut également être utilisé pour des applications d’immunohistochimie (1:25, en utilisant des coupes de tissus humains ou animaux) et d’immunofluorescence indirecte (1:40, en utilisant des fibroblastes de poulet).
Utilisé pour étudier la structure et la fonction de l’actine et pour sonder les sites de liaison des protéines de liaison à l’actine. Les lysats de protéines générés à partir de tissus de membres embryonnaires de souris ont été analysés par western blot en utilisant l’actine comme contrôle de chargement. L’actine a été détectée à l’aide d’un anti-actine de lapin à 1:8000. L’actine détectée par un anticorps anti-actine de lapin a été utilisée comme contrôle de charge pour les lysats de cellules MCF7. L’actine a été détectée à 42 kDa.
Utilisé pour étudier la structure et la fonction de l’actine et pour sonder les sites de liaison des protéines de liaison à l’actine. Des lysats protéiques générés à partir de tissus de membres embryonnaires de souris ont été analysés par western blot en utilisant l’actine comme contrôle de charge. L’actine a été détectée à l’aide d’un anti-actine de lapin à 1:8000. L’actine détectée par un anticorps anti-actine de lapin a été utilisée comme contrôle de charge pour les lysats de cellules MCF7 . L’actine a été détectée à 42 kDa.
Forme physique
Solution dans une solution saline tamponnée au phosphate 0,01 M, pH 7,4, contenant 1% d’albumine de sérum bovin et 15 mM d’azide de sodium comme conservateur.
Conservation et stabilité
Pour une utilisation continue, conserver à 2-8 °C pendant un mois maximum.
Pour une conservation prolongée, la solution peut être congelée en aliquotes de travail. La congélation et la décongélation répétées, ou le stockage dans des congélateurs « sans givre », ne sont pas recommandés. Si une légère turbidité apparaît lors d’un stockage prolongé, clarifier la solution par centrifugation avant utilisation.
Avis de non-responsabilité
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Actions biochimiques/physiologiques
L’actine est une protéine du cytosquelette qui régule la motilité cellulaire, la sécrétion, la phagocytose et la cytokinèse. L’extrémité NH2-terminale de l’actine peut fonctionner comme un antigène. Ce terminal peut également moduler les interactions de l’actine et s’associer à des protéines telles que la myosine. La protéine actine est essentielle pour la formation de plaquettes matures.
Les mutations dans ACTA1 (actine, α 1) est connu pour causer la myopathie des filaments minces comme la myopathie némaline, la myopathie congénitale, la myopathie de l’actine, la myopathie des bâtonnets intranucléaires, la myopathie de la coiffe et la myopathie du noyau. La régulation positive du gène est observée lors d’une transplantation hépatique orthotopique sans aucun signe antérieur de maladie hépatique auto-immune. La protéine codée actine forme un réseau de filaments et est responsable de la forme de la cellule. Elle assure la solidité cellulaire et favorise le mouvement actif de la cellule.
Autres remarques
Pour consulter un guide de sélection des anticorps anti-actine, rendez-vous sur www.sigmaaldrich.com/actin.