Surveillance des risques pour la santé publiqueEdit
Dans les eaux des États-Unis, du Canada et d’autres pays, la qualité de l’eau est surveillée pour protéger la santé du grand public. La contamination bactérienne est l’un des polluants surveillés. Aux États-Unis, le dosage des coliformes fécaux est l’un des neuf tests de la qualité de l’eau qui forment l’évaluation globale de la qualité de l’eau dans un processus utilisé par l’EPA. Le dosage des coliformes fécaux ne doit être utilisé que pour évaluer la présence de matières fécales dans des situations où les coliformes fécaux d’origine non fécale ne sont pas couramment rencontrés. L’EPA a approuvé un certain nombre de méthodes différentes pour analyser les échantillons à la recherche de bactéries.
AnalyseEdit
Les bactéries se reproduisent rapidement si les conditions sont propices à leur croissance. La plupart des bactéries se développent mieux dans des environnements sombres, chauds et humides avec de la nourriture. Lorsqu’elles sont cultivées sur des supports solides, certaines bactéries forment des colonies en se multipliant, qui peuvent devenir assez grandes pour être vues. En cultivant et en comptant les colonies de bactéries coliformes fécales à partir d’un échantillon d’eau, on peut déterminer la quantité de bactéries présentes à l’origine.
La filtration sur membrane est la méthode de choix pour l’analyse des coliformes fécaux dans l’eau. Les échantillons à analyser passent à travers un filtre de taille de pores particulière (généralement 0,45 micromètre). Les micro-organismes présents dans l’eau restent sur la surface du filtre. Le filtre est placé dans une boîte de Pétri stérile avec un milieu sélectif, la croissance des organismes souhaités est encouragée, tandis que les autres organismes non ciblés sont supprimés. Chaque cellule se développe en une colonie distincte, qui peut être comptée directement, et la taille de l’inoculum initial peut être déterminée. En général, des volumes d’échantillons de 100 ml seront utilisés pour l’analyse de l’eau et filtrés, dans le but d’obtenir une densité finale de colonies souhaitable comprise entre 20 et 60 colonies par filtre. Les sources contaminées peuvent nécessiter une dilution pour obtenir une membrane » dénombrable « . Le filtre est placé sur une boîte de Pétri contenant de la gélose M-FC et incubé pendant 24 heures à 44,5 °C (112,1 degrés F). Cette température élevée provoque un choc thermique sur les bactéries non fécales et supprime leur croissance. Au fur et à mesure que les colonies de coliformes fécaux se développent, elles produisent un acide (par la fermentation du lactose) qui réagit avec le colorant aniline de la gélose, donnant ainsi aux colonies leur couleur bleue.
De nouvelles méthodes de détection des coliformes sont basées sur des substrats enzymatiques spécifiques comme indicateurs des coliformes. Ces tests utilisent un sucre lié à un colorant qui, lorsqu’il est agi par l’enzyme bêta-galactosidase, produit une couleur caractéristique. L’enzyme bêta-galactosidase est un marqueur des coliformes en général et peut être testée par hydrolyse de glycosides spécifiques à l’enzyme, tels que l’o-nitrophényl-bêta-D-galactose. Les tests comprennent généralement un second sucre lié à un colorant différent qui, lorsqu’il est attaqué par l’enzyme bêta-glucuronidase, donne un produit fluorescent. Comme E. coli produit à la fois de la bêta-galactosidase et de la bêta-glucuronidase, une combinaison de deux colorants permet de différencier et de quantifier les coliformes et E. coli dans le même pot.
Plus récemment, la chimie derrière les composés de détection enzymatique a été mise à jour de sorte que le composant indicateur est redox actif, par opposition au format chromogène plus habituel, permettant aux bactéries indicatrices fécales telles que E. coli et E. faecalis d’être détectées électrochimiquement sans aucun prétraitement de l’échantillon. La couleur du composé de détection étant sans conséquence, cela permet la détection dans des matrices profondément colorées.
Les exigences d’analyse de l’EPAEdit
La règle de 1989 de l’EPA sur les coliformes totaux (TCR) a imposé des changements majeurs en matière de surveillance pour les systèmes d’eau publics. Les exigences d’analyse de l’eau potable en vertu de la TCR sont nettement plus élevées que les exigences précédentes et sont donc plus approfondies. Non seulement le nombre de tests de routine sur les coliformes est augmenté, en particulier pour les petits services d’eau, mais la réglementation exige également la répétition automatique des tests à partir de toutes les sources qui présentent un positif pour les coliformes totaux (connu sous le nom de surveillance déclenchée des sources d’eau).
Depuis 2009, l’EPA travaille sur des révisions de la TCR. Les questions prises en compte par l’Agence comprennent les lieux d’échantillonnage, la fréquence et le moment de l’échantillonnage, les méthodes d’analyse et les mesures correctives à prendre par les systèmes d’eau publics.
Il s’agit d’une révision de la réglementation.