Recrutement et stratégie d’échantillonnage :
Les participants seront recrutés au sein de l’Université de Chester, au Royaume-Uni uniquement. Des courriels et des affiches/dépliants seront utilisés comme moyen de publicité auprès du groupe cible (personnel et étudiants). Un total de 62 femmes pré-ménopausées âgées de 19 à 40 ans seront incluses dans l’étude sur la base des critères décrits ci-dessous. L’éligibilité sera basée sur les concentrations de ferritine sérique et de vitamine D lors du dépistage avant le début de l’étude. Les participants devront remplir un questionnaire de dépistage qui fournira des informations sur leur état de santé, leur consommation de drogues/médicaments/compléments et les cas récents de maladie/traumatisme/blessure. Un prélèvement de sang veineux de 6 ml sera effectué pour évaluer les concentrations de ferritine plasmatique, de vitamine D, d’hémoglobine et la formule sanguine complète. Les participants dont les concentrations de ferritine plasmatique sont inférieures à 20,0 µg/l et la concentration de vitamine D inférieure à 250 nmol/l seront inclus dans l’étude. Si les niveaux d’hémoglobine s’avèrent être au stade sévère de l’anémie, le participant potentiel sera informé et conseillé de consulter son médecin généraliste (GP) (niveaux d’hémoglobine < 8,0 g/dL). Tous les participants éligibles seront informés du protocole de l’étude avant le début de l’étude, et les participants éligibles recevront une fiche d’information du participant (PIS) et seront invités à fournir un consentement éclairé écrit.
Un essai contrôlé randomisé en double aveugle de 8 semaines sera réalisé à Chester, au Royaume-Uni (UK). La période d’intervention de 8 semaines a été choisie car plus d’un mois est approprié pour élargir généralement la moelle érythropoïétique et observer des changements dans les indices de globules rouges, en particulier dans les groupes non anémiques. La plupart des études sur la vitamine D ont utilisé une concentration de supplément de 1000 UI et n’ont signalé aucun effet indésirable chez les participants. Certaines études ont utilisé des doses plus élevées de 1600 ou 4000 UI sans qu’aucun effet indésirable n’ait été signalé chez les participants.
Les participants seront répartis au hasard dans 2 groupes :
- Groupe fer (céréales pour petit-déjeuner enrichies en fer et placebo)
- Groupe vitamine D (céréales pour petit-déjeuner enrichies en fer et vitamine D3).
Chaque participant consommera 60 grammes de céréales pour petit-déjeuner enrichies en fer contenant un total de 9 mg de fer par jour pendant 8 semaines avec soit un placebo de vitamine D3, soit de la vitamine D3 (1500 UI) selon le groupe qui lui a été attribué. Les participants consommeront les céréales enrichies en fer pour le petit-déjeuner le matin, avec 200 ml de lait demi-écrémé par jour pendant 8 semaines. Les participants consommeront la vitamine D ou le placebo le soir avec 200 ml d’eau. Il sera demandé aux participants de maintenir leurs habitudes alimentaires et leur activité physique au cours de l’étude. Il leur sera également demandé de ne pas donner de sang pendant la durée de l’étude. Les suppléments restants seront rendus lors de la dernière clinique (semaine 8), et l’observance sera estimée.
Les participants devront assister à 3 cliniques au total sur une période de 8 semaines, et ils seront évalués au départ (jour 0), à l’intérim (semaine 4) et après l’intervention (semaine 8). Il sera demandé aux participants de rester à jeun pendant environ 8 heures avant chaque consultation. À chaque clinique, un échantillon de sang de 30 ml sera prélevé et la taille (cm) et le poids (kg) seront mesurés. Avant le début et la fin de l’étude, les participants devront tenir un journal alimentaire de trois jours, dont deux jours de semaine et un jour de week-end, afin de représenter l’apport alimentaire habituel du participant. Des échantillons de sang seront analysés par lots à la fin de l’intervention pour évaluer tous les biomarqueurs du statut en fer et du métabolisme de la vitamine D.
Taille de l’échantillon et justification :
La taille de l’échantillon a été estimée en utilisant les données de supplémentation en fer d’une étude réalisée par Scholz-Ahrens et al. (2004) dans laquelle une concentration de ferritine sérique après intervention à 8 semaines (moyenne ± S.D) de 17,7 ± 11,8 ug/l (groupe lait enrichi en fer) et 10,6 ± 8,1 ug/l (groupe lait non enrichi) a été rapportée. Avec une taille d’effet de 0,7015447, la taille totale de l’échantillon nécessaire pour chaque groupe dans l’étude proposée est de 26. En tenant compte d’un taux d’abandon de 20 %, la taille totale de l’échantillon nécessaire est de 31 (puissance = 0,80). Par conséquent, la taille totale de l’échantillon nécessaire pour l’ensemble de l’étude est de 62. La taille de l’échantillon a été estimée à l’aide du logiciel G Power Software version 3.1.7.
Analyse statistique:
Toutes les analyses statistiques seront effectuées avec le logiciel Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) d’International Business Machines (IBM) Statistic Data Editor (version 21). En supposant que les données sont normalement distribuées après avoir effectué un test de normalité de Shapiro Wilks, une analyse de variance à une voie (ANOVA) avec mesures répétées sera effectuée pour comparer les différences moyennes pour tous les paramètres mesurés au sein de chaque groupe au départ, à l’intérim et après l’intervention. Les changements dans les paramètres mesurés entre les périodes de l’étude seront analysés à l’aide d’un test t apparié. Le test de corrélation de Pearson sera effectué pour étudier la relation entre le profil d’hepcidine et les biomarqueurs du statut ferrique. Une approche non paramétrique sera adoptée si les données ne sont pas normalement distribuées pour toutes les analyses. Les différences seront considérées comme significatives avec une valeur p ≤ 0,05.
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