Descrizione generale
L’actina, una proteina altamente conservata, è un componente principale delle strutture citoscheletriche e contrattili in tutti i tipi di cellule. Varia in quantità, essendo legata al tipo di differenziazione e allo stato funzionale delle cellule e dei tessuti. L’actina può essere trovata in due forme diverse di aggregazione, lo stato globulare o fibrillare, e almeno sei isoforme distinte sono presenti nei vertebrati. Le actine presentano un’omologia di sequenza superiore al 90%, ma ogni isoforma ha una sequenza NH2-terminale unica.
Il gene ACTA1 (actina, α 1) è mappato sul cromosoma umano 1q42.13. Il gene codifica per l’actina 1, un componente del filamento sottile del muscolo scheletrico.
In immunoblotting, il prodotto localizza l’actina in molte specie che vanno dal muscolo scheletrico umano all’ameba. Il prodotto riconosce la banda di actina di 42 kDa usando tecniche di immunoblotting in estratti di tessuto umano o animale.
Specificità
Anti-Actin macchia specificamente le tipiche fibre di stress nei fibroblasti di pollo in coltura.
Immunogeno
Il frammento di actina C-terminale attaccato al backbone del Multiple Antigen Peptide (MAP).
Applicazione
Può essere usato per studiare la struttura e la funzione dell’actina e per sondare i siti di legame delle proteine legate all’actina.
L’anticorpo di coniglio anti-actina può essere usato per i saggi western blot. L’anticorpo può anche essere usato per applicazioni di immunoistochimica (1:25, usando sezioni di tessuto umano o animale) e di immunofluorescenza indiretta (1:40, usando fibroblasti di pollo). I lisati proteici generati dal tessuto embrionale degli arti del topo sono stati analizzati mediante western blot utilizzando l’actina come controllo di carico. L’actina è stata rilevata utilizzando coniglio anti-actina a 1:8000. L’actina rilevata da un anticorpo di coniglio anti-actina è stato utilizzato come controllo di carico per i lisati di cellule MCF7. L’actina è stata rilevata a 42 kDa.
Usato per studiare la struttura e la funzione dell’actina e per sondare i siti di legame delle proteine leganti l’actina. I lisati proteici generati dal tessuto degli arti del topo embrionale sono stati analizzati tramite western blot usando l’actina come controllo di carico. L’actina è stata rilevata utilizzando coniglio anti-actina a 1:8000. L’actina rilevata da un anticorpo di coniglio anti-actina è stata utilizzata come controllo di carico per i lisati di cellule MCF7. L’actina è stata rilevata a 42 kDa.
Forma fisica
Soluzione in tampone fosfato 0.01 M, pH 7.4, contenente 1% sieroalbumina bovina e 15 mM sodio azide come conservante.
Conservazione e stabilità
Per uso continuo, conservare a 2-8 °C per un massimo di un mese. Si sconsiglia il congelamento e lo scongelamento ripetuti o la conservazione in congelatori “senza gelo”. Se si verifica una leggera torbidità dopo una conservazione prolungata, chiarire la soluzione mediante centrifugazione prima dell’uso.
Disclaimer
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Azioni biochimiche/fisiologiche
L’actina è una proteina citoscheletrica che regola la motilità cellulare, la secrezione, la fagocitosi e la citochinesi. L’NH2-terminale dell’actina può funzionare come antigene. Questo terminale può anche modulare le interazioni dell’actina e può associarsi a proteine come la miosina. La proteina dell’actina è essenziale per la formazione di piastrine mature.
Mutazioni in ACTA1 (actina, α 1) è nota per causare miopatia del filamento sottile come la miopatia nemalina, miopatia congenita, miopatia dell’actina, miopatia intranucleare dell’asta, miopatia del cappuccio e miopatia del nucleo. L’aumento del gene è osservato nel trapianto epatico ortotopico senza alcuna evidenza precedente di malattia epatica autoimmune. La proteina codificata actina forma una rete di filamenti ed è responsabile della forma della cellula. Fornisce la forza cellulare e promuove il movimento attivo della cellula.
Altre note
Per visualizzare una guida alla selezione degli anticorpi Actin, visitare www.sigmaaldrich.com/actin.