Estructura y genomaEditar
Los virus Lassa son virus de ARN ambisensos, bisegmentados, monocatenarios y con envoltura. Su genoma está contenido en dos segmentos de ARN que codifican dos proteínas cada uno, una en cada sentido, para un total de cuatro proteínas virales.El segmento grande codifica una pequeña proteína dedo de zinc (Z) que regula la transcripción y replicación,y la ARN polimerasa (L). El segmento pequeño codifica la nucleoproteína (NP) y el precursor de la glicoproteína de superficie (GP, también conocido como espiga viral), que se escinde proteolíticamente en las glicoproteínas de envoltura GP1 y GP2 que se unen al receptor alfa-distroglicano y median la entrada en la célula huésped.
La fiebre de Lassa causa una fiebre hemorrágica que se manifiesta frecuentemente con inmunosupresión. El mammarenavirus Lassa se replica muy rápidamente, y demuestra un control temporal en la replicación. El primer paso de la replicación es la transcripción de copias de ARNm del genoma de sentido negativo o minúsculo. Esto garantiza un suministro adecuado de proteínas víricas para los siguientes pasos de la replicación, ya que las proteínas NP y L se traducen a partir del ARNm. El genoma de sentido positivo o plus, hace entonces copias de ARN complementario viral (ARNvc) de sí mismo. Las copias de ARN son una plantilla para producir la progenie de sentido negativo, pero el ARNm también se sintetiza a partir de él. El ARNm sintetizado a partir del ARNvc se traduce para producir las proteínas GP y Z. Este control temporal permite que las proteínas de la espiga se produzcan en último lugar y, por tanto, retrasen el reconocimiento por parte del sistema inmunitario del huésped.
Los estudios de nucleótidos del genoma han demostrado que Lassa tiene cuatro linajes: tres encontrados en Nigeria y el cuarto en Guinea, Liberia y Sierra Leona. Parece probable que las cepas nigerianas sean ancestrales a las demás, pero se requieren trabajos adicionales para confirmarlo.
ReceptoresEditar
El mammarenavirus Lassa consigue entrar en la célula huésped por medio del receptor de la superficie celular el alfa-distroglicano (alfa-DG), un receptor versátil para las proteínas de la matriz extracelular. Comparte este receptor con el arenavirus prototípico del Viejo Mundo, el virus de la coriomeningitis linfocítica. El reconocimiento del receptor depende de una modificación específica del azúcar del alfa-distroglicano por un grupo de glucosiltransferasas conocidas como proteínas LARGE. Las variantes específicas de los genes que codifican estas proteínas parecen estar bajo selección positiva en África Occidental, donde el Lassa es endémico. El alfa-distroglicano también es utilizado como receptor por los virus del clado C de arenavirus del Nuevo Mundo (virus Oliveros y Latino). En cambio, los arenavirus del Nuevo Mundo de los clados A y B, que incluyen los importantes virus Machupo, Guanarito, Junín y Sabia, además del virus no patógeno Amapari, utilizan el receptor 1 de la transferrina. Un pequeño aminoácido alifático en la posición 260 del aminoácido de la glicoproteína GP1 es necesario para la unión de alta afinidad a la alfa-DG. Además, la posición 259 del aminoácido de la GP1 también parece ser importante, ya que todos los arenavirus que muestran una unión de alta afinidad a la alfa-DG poseen un aminoácido aromático voluminoso (tirosina o fenilalanina) en esta posición.
A diferencia de la mayoría de los virus con envoltura, que utilizan fosas recubiertas de clatrina para entrar en la célula y se unen a sus receptores de forma dependiente del pH, los virus de Lassa y de la coriomeningitis linfocítica utilizan una vía endocítica independiente de la clatrina, la caveolina, la dinamina y la actina. Una vez dentro de la célula, los virus son llevados rápidamente a los endosomas a través del tráfico vesicular, aunque éste es ampliamente independiente de las pequeñas GTPasas Rab5 y Rab7. Al entrar en contacto con el endosoma se produce una fusión de membranas dependiente del pH, mediada por la glicoproteína de la envoltura, que en el pH más bajo del endosoma se une a la proteína del lisosoma LAMP1, lo que da lugar a la fusión de membranas y al escape del endosoma.
Ciclo de vidaEditar
El ciclo de vida del mammarenavirus Lassa es similar al de los arenavirus del Viejo Mundo. El mammarenavirus Lassa entra en la célula por la endocitosis mediada por el receptor. Todavía no se sabe qué vía endocítica se utiliza, pero al menos la entrada celular es sensible al agotamiento del colesterol. Se ha informado de que la internalización del virus está limitada por la disminución del colesterol. El receptor utilizado para la entrada celular es el alfa-distroglicano, un receptor de la superficie celular altamente conservado y expresado de forma ubicua para las proteínas de la matriz extracelular. El distroglicano, que posteriormente se escinde en alfa-distroglicano y beta-distroglicano, se expresa originalmente en la mayoría de las células hasta los tejidos maduros, y proporciona el enlace molecular entre la MEC y el citoesqueleto basado en la actina. Después de que el virus entre en la célula por endocitosis mediada por el alfa-distroglicano, el entorno de bajo pH desencadena la fusión de la membrana dependiente del pH y libera el complejo RNP (ribonucleoproteína viral) en el citoplasma. El ARN vírico se desempaqueta y la replicación y la transcripción se inician en el citoplasma. Al iniciarse la replicación, los genomas del ARN S y L sintetizan los ARN S y L antigenómicos, y a partir de los ARN antigenómicos se sintetizan los ARN S y L genómicos. Tanto los ARN genómicos como los antigenómicos son necesarios para la transcripción y la traducción. El ARN S codifica las proteínas GP y NP (proteína de la nucleocápside viral), mientras que el ARN L codifica las proteínas Z y L. La proteína L representa probablemente la ARN polimerasa viral dependiente del ARN. Cuando la célula es infectada por el virus, la L polimerasa se asocia a la RNP viral e inicia la transcripción del ARN genómico. Las regiones promotoras virales 5′ y 3′ terminales de 19 nt de ambos segmentos de ARN son necesarias para el reconocimiento y la unión de la polimerasa viral. La transcripción primaria transcribe primero los ARNm del genoma S y L, que codifican las proteínas NP y L, respectivamente. La transcripción termina en la estructura de bucle de tallo (SL) dentro de la región intergenómica. Los arenavirus utilizan una estrategia de cap snatching para obtener las estructuras cap de los ARNm celulares, y está mediada por la actividad endonucleasa de la polimerasa L y la actividad de unión cap de la NP. El ARN antigenómico transcribe los genes virales GPC y Z, codificados en la orientación genómica, a partir de los segmentos S y L respectivamente. El ARN antigenómico también sirve como plantilla para la replicación. Después de la traducción de la GPC, se modifica postraduccionalmente en el retículo endoplásmico. La GPC se escinde en GP1 y GP2 en la fase posterior de la vía secretoria. Se ha informado de que la proteasa celular SKI-1/S1P es responsable de esta escisión. Las glicoproteínas escindidas se incorporan a la envoltura del virión cuando el virus brota y se libera de la membrana celular.