Como discutimos no ciclo celular, antes das células poderem entrar na fase M têm de cumprir certos requisitos celulares. Entre estes requisitos estão o tamanho celular e o ambiente celular adequados. Após a fase S de replicação do ADN, as células contêm o dobro do seu número normal de cromossomas. Como as células que sofrem de mitose são diplóides, o seu número de cromossomas pode ser representado como 2N, onde N é igual ao número de cromossomas distintos na célula. As células prestes a entrar na fase M, que passaram pela fase S e replicaram o seu ADN, têm 4N cromossomas. A entrada na fase M é permitida pela formação do complexo mitótico ciclino-Cdk conhecido como factor promotor da fase M que ocorre como mecanismo regulador do ciclo celular na fase G2.
A primeira fase da mitose dentro da fase M é chamada de prófase. Segue-se à fase G2, a fase final da interfase. Uma célula que entra na fase M manifesta uma série de sinais de fisicsl. Entre estes estão a condensação, ou engrossamento, dos cromossomas. A condensação cromossómica é visível através de um microscópio e é necessária para a separação subsequente dos cromossomas durante as fases posteriores da mitose. Outra característica física das células que começam a mitose é a germinação de microtúbulos a partir de centrosomas replicados. Os microtubos são filamentos de proteínas nos quais os cromossomas migram durante a mitose.
Profase
Como discutimos, a prófase é marcada por cromossomas muito espessos e densos. Nesta fase, os cromossomas estão ainda encerrados no núcleo da célula dentro do envelope nuclear. Os cromossomas também contêm um centrómero, que é necessário em fases posteriores para a fixação a microtubos para migração. Tarde na fase de prófase, os cinétogramas montam-se nos centrómeros. Microtubos especializados, chamados microtubos de cinétocole, fixam-se mais tarde a estes locais. Os centrosomas duplicados, que são os centros organizadores dos microtubos, começam a separar-se em direcção a pólos opostos da célula. A rede de componentes citoesqueléticos começa a decompor-se e o fuso mitótico forma-se. O fuso mitótico é um arranjo de microtubos que é responsável pelo alinhamento de cromossomas duplicados em fases posteriores.
Prometafase
O evento principal que marca a entrada de uma célula na prometaphase é a decomposição do envelope nuclear em pequenas vesículas. Os cine-tochores também amadurecem totalmente nos centromeros dos cromossomas. A ruptura do envelope nuclear permite que os fusos mitóticos tenham acesso aos cinematóforos maduros. medida que os microtubos do fuso mitótico entram na região nuclear, alguns fixam-se aos cinetos, tornando-os microtubos cintócitos. Os restantes microtubulos são chamados microtubulos não cinétócicos. Os cromatídeos-irmãs são capturados por microtubulos provenientes de centrosomas em extremidades opostas da célula. Uma vez capturados os cromossomas, os microtubos cinetócitos começam a exercer força sobre os cromossomas, movendo-os.