Algemene beschrijving
Actine, een sterk geconserveerd eiwit, is een belangrijke component van zowel de cytoskelet- als de contractiele structuren in alle celtypen. De hoeveelheid varieert en hangt samen met het type differentiatie en met de functionele toestand van cellen en weefsels. Actine komt voor in twee verschillende aggregatievormen, de globulaire of de fibrillaire, en bij vertebraten komen ten minste zes verschillende isovormen voor. De actines vertonen meer dan 90% sequentie homologie, maar elke isovorm heeft een unieke NH2-terminale sequentie.
Het ACTA1 (actine, α 1) gen is gekarteerd op humaan chromosoom 1q42.13. Het gen codeert voor actine 1, een component van dunne filamenten in skeletspieren.
In immunoblotting lokaliseert het product actine in vele soorten, variërend van menselijke skeletspieren tot amoeben. Het product herkent de 42 kDa actine band met behulp van immunoblotting technieken in menselijke of dierlijke weefselextracten.
Specificiteit
Anti-Actine kleurt specifiek de typische stressvezels in gekweekte kippenfibroblasten.
Immunogeen
Het C-terminale actinefragment gebonden aan een Multiple Antigen Peptide (MAP) ruggengraat.
Toepassing
Kan worden gebruikt om de structuur en functie van actine te bestuderen en om bindingsplaatsen van actine-bindende eiwitten te peilen.
Honijn anti-actine antilichaam kan worden gebruikt voor western blot assays. Het antilichaam kan ook worden gebruikt voor immunohistochemie (1:25, met gebruik van menselijke of dierlijke weefselsecties) en indirecte immunofluorescentie (1:40, met gebruik van kippenfibroblasten) toepassingen.
Gebruikt om de structuur en functie van actine te bestuderen en om bindingsplaatsen van actine-bindende eiwitten vast te stellen. Eiwitlysaten gegenereerd uit embryonaal ledemaatweefsel van de muis werden geanalyseerd met behulp van western blot met actine als laadcontrole. Actine werd gedetecteerd met konijn anti-actine in een verhouding van 1:8000. Actine gedetecteerd door een konijn anti-actine antilichaam werd gebruikt als een laadcontrole voor MCF7 cel lysaten. Actine werd gedetecteerd bij 42 kDa.
Gebruikt om actinestructuur en -functie te bestuderen en om bindingsplaatsen van actine-bindende eiwitten te peilen. Eiwitlysaten gegenereerd uit embryonaal ledemaatweefsel van de muis werden geanalyseerd met behulp van western blot met actine als laadcontrole. Actine werd gedetecteerd met konijn anti-actine in een verhouding van 1:8000. Actine gedetecteerd door een konijn anti-actine antilichaam werd gebruikt als een loading controle voor MCF7 cel lysaten. Actine werd gedetecteerd bij 42 kDa.
Fysische vorm
Oplossing in 0,01 M fosfaatgebufferde zoutoplossing, pH 7,4, met 1% boviene serumalbumine en 15 mM natriumazide als conserveermiddel.
Opslag en stabiliteit
Voor continu gebruik, maximaal één maand bewaren bij 2-8 °C.
Voor langere opslag kan de oplossing worden ingevroren in werkaliquots. Herhaald invriezen en ontdooien, of opslag in “vorstvrije” diepvriezers, wordt niet aanbevolen. Indien bij langdurige opslag lichte troebeling optreedt, klaart u de oplossing vóór gebruik door centrifugeren.
Disclaimer
Tenzij anders vermeld in onze catalogus of andere bedrijfsdocumentatie bij het product of de producten, zijn onze producten uitsluitend bestemd voor onderzoek en mogen niet worden gebruikt voor enig ander doel, inclusief maar niet beperkt tot, ongeoorloofd commercieel gebruik, in vitro diagnostisch gebruik, ex vivo of in vivo therapeutisch gebruik of enige vorm van consumptie of toepassing op mens of dier.
Biochemische/fysiologische acties
Actine is een cytoskeletaal eiwit dat de beweeglijkheid, secretie, fagocytose en cytokinese van cellen regelt. De NH2-terminal van actine kan fungeren als een antigeen. Dit eindpunt kan ook actine-interacties moduleren en kan zich associëren met eiwitten zoals myosine. Actine-eiwit is essentieel voor de vorming van rijpe bloedplaatjes.
Mutaties in ACTA1 (actine, α 1) is bekend als de oorzaak van dunne filament myopathie, zoals nemaline myopathie, congenitale myopathie, actine myopathie, intranucleaire staaf myopathie, cap myopathie en core myopathie. Upregulatie van het gen wordt waargenomen bij orthotope levertransplantatie zonder eerdere aanwijzingen van auto-immuunleverziekte. Het gecodeerde eiwit actine vormt een netwerk van filamenten en is verantwoordelijk voor de vorm van de cel. Het zorgt voor cellulaire sterkte en bevordert actieve beweging van de cel.
Overige opmerkingen
Voor een selectiegids voor actine-antilichamen, zie www.sigmaaldrich.com/actin.