Heading

Een 2,5-jarige commerciële zeug werd geslacht in een slachthuis in Catalonië, Spanje, en er werden monsters ingestuurd voor onderzoek. Bij navraag meldden de inspecteurs die het monster hadden ingeleverd geen antemortemveranderingen. Helaas kon van het bedrijf van herkomst geen verdere informatie worden verkregen. De macroscopische beschrijving van de veterinaire inspecteur luidde dat tijdens de postmortemkeuring in de rechter perirenale regio een multinodulaire, witachtige massa van 20 cm × 10 cm werd waargenomen, met een stevige consistentie. De doorsnede toonde verschillende gebieden met korrelig oppervlak en kleine witte knobbeltjes (Fig. 1A). Meerdere knobbeltjes met dezelfde macroscopische kenmerken werden unilateraal verspreid binnen het rechter nierparenchym waargenomen (Fig. 1B).

Figuur 1. A, perirenaal liposarcoom, varken. Multinodulaire, witachtige massa van stevige consistentie waargenomen in de rechter perirenale regio met verschillende verspreide gelige gebieden van necrose. B, multipele nierlaesies met dezelfde macroscopische kenmerken als die beschreven in paneel A, in het nierparenchym. C, perirenaal liposarcoom, varken. Verschillende patronen van neoplastische cellen werden waargenomen binnen de tumor. In de bovenste helft van de foto, zijn cellen weergegeven ondergedompeld in overvloedige collageenachtige stroma, in de onderste helft, het stroma was schaars en de meerderheid van de cellen toonde grote, duidelijke, en goed gedefinieerde lipide cytoplasmatische vacuolen. Hematoxyline en eosine. Bar = 20 pm. D, renale liposarcoom cellen die kleine tot middelgrote lipide vacuoles. Hematoxyline en eosine. Bar = 25 μm. E, perirenaal liposarcoom, varken. Tachtig procent van de neoplastische cellen hadden een sterke en diffuse cytoplasmatische positieve kleuring voor S100 immunohistochemie. Bar = 50 μm. F, perirenaal liposarcoom, varken. Kleuring van de neoplastische cellen van de perirenale massa, let op positief gekleurde intracytoplasmatische lipide gevulde vacuolen. Soedan zwart. Bar = 25 μm.

De nier en verschillende secties van de perirenale massa werden verzameld, gefixeerd in 10% formaline, en voor diagnose voorgelegd aan het Servei de Suport a Escorxadors (Slachthuis Ondersteuningsnetwerk) van het Centrum voor Onderzoek in Diergezondheid (Centre de Recerca en Sanitat Animal ; Barcelona, Spanje). De differentiële diagnose door de vleesinspecteurs omvatte lymfosarcoom of een bijniertumor. In het laboratorium werden de monsters routinematig verwerkt voor histologie. Secties werden bewerkt voor hematoxyline en eosine kleuring. Immunohistochemische kleuring (IHC) met antilichamen tegen cluster van differentiatie (CD)3a en CD20b werden uitgevoerd om een mogelijke lymfoïde oorsprong uit te sluiten. Lysozymec IHC werd ook uitgevoerd om een macrofagene oorsprong van de tumor uit te sluiten en S100d IHC om een fibrosarcoom uit te sluiten, dat immunoreactiviteit voor dit eiwit mist.4 Tenslotte werd IHC tegen vimentine uitgevoerd om de mesenchymale oorsprong van het neoplasma te bevestigen.

In het kort: warmte-geïnduceerde antigeen retrieval werd uitgevoerd in een autostainer,f bij 95°C met lage pH target retrieval oplossing gedurende 20 min vóór toepassing van primaire antilichamen voor CD3, CD20, S100, en vimentine. Voor de lysozym IHC, dia’s werden voorbehandeld met proteinase K gedurende 10 min bij kamertemperatuur.

Voor IHC controle doeleinden, varkens lymfeklierweefsel voor CD3 en CD20 werd gebruikt. Een cerebellum sectie werd gekozen als controle voor S100 IHC, een tongweefsel sectie voor vimentine IHC, en, voor lysozym IHC, huid met granulomateuze dermatitis werd gebruikt. Weglating van het primaire antilichaam in elk objectglaasje diende als niet-specifieke reactiecontrole.

Sudan black stainingg werd uitgevoerd op cryotoom-verkregen secties van formaline-vaste weefsels, om de inhoud van de cytoplasmatische vacuolen te identificeren. Als controle techniek werd regulier vetweefsel gebruikt.

De massa was een dicht cellulair, infiltratief, en gedeeltelijk ingekapseld neoplasma. De cellen waren gerangschikt in compacte maar ongeorganiseerde bundels met overvloedig collageen stroma, schaarse myxoïde matrix, en enkele bloedvaten. De cellen waren middelgroot en spilvormig, met slecht gedefinieerde randen. De cellen hadden een matige hoeveelheid fibrillair, bleek en eosinofiel cytoplasma. In sommige gebieden hadden de cellen middelgrote tot grote, goed gedefinieerde, lipide intracytoplasmatische vacuolen (Fig. 1C). De kernen waren paracentraal, ovaal en groot met fijn gestippeld chromatine en 1 of 2 eosinofiele nucleoli. Anisocytose en anisokaryose waren duidelijk, en sommige karyomegalische cellen konden worden waargenomen. De mitotische index was laag (0-1 mitotische figuren in 10 willekeurige velden bij 400×). Volwassen eosinofielen met enkele lymfocyten waren verspreid tussen de neoplastische cellen. Er waren ook multifocaal grote gebieden van necrose en mineralisatie. In de nier daarentegen waren de meeste neoplastische cellen polygonaal en slechts enkele hadden spilvormen en intracytoplasmatische lipide vacuolen. Foci van deze tumorcellen waren multifocaal aanwezig binnen de niercortex. Het pleomorfisme en de mitotische index waren hoger (2-3 mitotische figuren in 10 willekeurige velden bij 400×). Op basis van de histologische kenmerken van de perirenale massa, en een positief resultaat tegen vimentine IHC op meer dan 90% van de tumorcellen, werd een diagnose van anaplastische maligne mesenchymale celtumor vastgesteld.

Differentiële diagnose omvatte histiocytair sarcoom, fibrosarcoom, en liposarcoom. Tachtig procent van de cellen, vooral die met spindelvormen, waren intens positief voor S100 IHC in het cytoplasma en de kernen (Fig. 1E). Het Soedanzwart-positieve resultaat bevestigde de lipide-natuur van de cytoplasmatische vacuolen van de neoplastische cellen (Fig. 1F). De macroscopische en histologische kenmerken van de perirenale massa, samen met Soedan zwart en IHC, leidden dus tot de diagnose van een maligne liposarcoom. Hoewel de cellen van de niermassa aanvankelijk suggereerden dat het om een tumor met ronde cellen ging, waren IHC van CD3,b CD20,c en lysozymed negatief voor de 3 markers in de nier en de perirenale tumoren. Deze resultaten sloten de mogelijkheid van een rondceltumor uit en ondersteunden de hypothese van een gemeenschappelijke mesenchymateuze oorsprong van beide neoplastische laesies. De renale laesie werd beschouwd als een metastase van het primaire liposarcoom. Gebaseerd op de cellulaire morfologie, werden de verwijderde massa’s geclassificeerd als een pleomorf liposarcoom.

De meest gemelde tumoren bij varkens zijn die bij jonge varkens, zoals lymfosarcoom, embryonaal nefroom en melanoom.15 Dit komt doordat de meerderheid van de varkens wordt geslacht voordat ze volwassen zijn, wanneer tumoren zich vaak ontwikkelen.15 Op basis van slachthuisonderzoeken is lymfoom de meest frequente tumor bij varkens, waarbij meestal varkens van een jaar of jonger worden aangetast.22,40 In een retrospectieve studie bij 63 hangbuikzwijnen werd de incidentie van tumoren samengevat en werd een verscheidenheid aan neoplasma’s bij varkens beschreven zonder aanwijzingen voor liposarcomen. De gemiddelde leeftijd van de ontwikkeling van de tumor in die studie was 11,3 jaar.39 Er zijn zeer weinig gerapporteerde gevallen van lipomen bij varkens.62

Voor zover de auteurs weten, zijn liposarcomen niet gerapporteerd bij varkens. In het huidige rapport beschrijven we een liposarcoom dat zich vermoedelijk ontwikkelde vanuit het perirenale vet, met metastase naar het nierparenchym.

In de meeste gevallen van liposarcomen die in dit artikel zijn besproken, zijn IHC en histologische (lipide) kleuringen gebruikt om tot de uiteindelijke diagnose te komen, omdat histologisch onderzoek een slecht gedefinieerde neoplastische proliferatie aan het licht bracht.42,59 Dergelijke methoden zijn ook gebruikt om de microscopische diagnose bij sommige goed gedifferentieerde liposarcomen te bevestigen.42 Vaak gebruikte markers zijn lipidenkleuring (zoals olierood O) en vimentine en S100 IHC. Al deze markers leveren positieve resultaten op, ongeacht het subtype liposarcoom en de diersoort waarin ze zijn gebruikt.1,16,42,59,65 Hoewel zeldzaam, moet deze diagnose worden opgenomen in de differentiële diagnose van neoplasma’s bij varkens.

Liposarcoom is een kwaadaardige tumor van adipocyten, voor het eerst beschreven door Rudolf Virchow in 1857.48 Traditioneel werd veel nadruk gelegd op de identificatie van lipoblasten voor de diagnose van liposarcomen, maar hun belang is in sommige situaties te veel benadrukt, aangezien lipoblast-achtige cellen in een verscheidenheid van aandoeningen kunnen worden waargenomen.67

Liposarcomen behoren tot de meest beschreven weke delen sarcomen bij volwassen mensen.10,11 De meest recente classificatie van weke delen tumoren door de Wereldgezondheidsorganisatie (WHO) onderscheidt 5 categorieën liposarcomen: goed gedifferentieerd (waaronder de adipocytische, scleroserende en inflammatoire subtypes), gededifferentieerd liposarcoom, myxoïd liposarcoom, rondcellig liposarcoom, en pleomorf liposarcoom.38 Hoewel liposarcomen in deze subtypes worden onderverdeeld, zijn de meest gebruikte categorieën goed gedifferentieerd liposarcoom, myxoïd liposarcoom en pleomorf liposarcoom.67 Goed gedifferentieerde liposarcomen zijn de meest voorkomende vorm van gerapporteerde kwaadaardige adipocytische neoplasmata, goed voor ongeveer 40-45% van alle liposarcomen, gevolgd door myxoïde liposarcomen (30-35%).11,67 Pleomorf liposarcoom is het minst voorkomende kwaadaardige adipocytische neoplasma, goed voor ongeveer 5% van alle gevallen.11 De beperkte aanwezigheid van cytoplasmatische lipide vacuolen kan geleid hebben tot een verkeerde diagnose van liposarcomen als ongedifferentieerd pleomorf sarcoom.41

In de diergeneeskunde is er geen geaccepteerde classificatie van liposarcomen, maar op basis van celmorfologie en volgens de WHO-classificatie worden liposarcomen bij dieren ingedeeld in 3 categorieën: goed gedifferentieerde, pleomorfe en myxoïde liposarcomen.3,22,38 Bij dieren zijn liposarcomen zeldzaam, maar ze kunnen bij veel gedomesticeerde en nietgedomesticeerde diersoorten voorkomen1,12,16,29,36,43,45,46,61 (tabel 1). Liposarcomen zijn het meest beschreven bij honden en bij deze diersoort neemt de incidentie toe met de leeftijd.3,13,22,31,66 De gemiddelde leeftijd van aangetaste honden is 9-10 jaar.3,13,32,66 De etiologie van liposarcomen bij honden is grotendeels onbekend, hoewel het in verband is gebracht met de aanwezigheid van vreemde voorwerpen.34,63 Bij een 11-jarige hond werd een liposarcoom in de voorpoot in verband gebracht met een vreemd voorwerp van glas.34 Bij een andere 11-jarige hond werd een laaggradig liposarcoom gediagnosticeerd met een subcutane massa in de laterale regio van de hals, op de plaats van een microchipimplantatie.63 Bij katten werd het in verband gebracht met vaccinatieplaatsen21 en retrovirusinfectie, hoewel niet kon worden bewezen dat de tumor door het virus werd veroorzaakt.57 De meerderheid van de liposarcomen zijn agressieve, lokaal invasieve neoplasma’s. De lokalisatie is onvoorspelbaar (tabel 1). Recidief komt vaak voor, maar metastatische verspreiding is zeldzaam, behalve in gevallen met duidelijke cellulaire anaplasie. Bij myxoïde liposarcomen kan het metastaseringspercentage oplopen tot 60% en bij pleomorfe liposarcomen tussen 30% en 50%.11 Bij honden zijn metastasen vooral gemeld in long, milt, lever, nier en lymfeklieren.3,17,38,65

Tabel 1. Meldingen van liposarcomen in de veterinaire literatuur.*

De myxoïde variant is een ongebruikelijke variant van liposarcomen, en wordt beschreven als multilobulair en niet-gekapseld met slecht gedefinieerde massamarges.4,30,31,35 Dit subtype bestaat meestal uit een mengsel van lipocyten, met een enkele grote en duidelijke cytoplasmatische lipide vacuole die de kernen comprimeert, lipoblasten, en verspreide spoel- en stellate cellen afgewisseld in een myxoïde achtergrond met een klein aantal collageen fibrillen.4,35,47 Enkele multinucleaire tumorcellen kunnen ook aanwezig zijn.4,21,30,47 Anastomoserende capillaire vasculatuur is eveneens aanwezig.31,35 Gelijkend op myxosarcoom, wordt deze tumor gedifferentieerd door de aanwezigheid van cytoplasmatische met lipiden gevulde vacuolen.4,21,30,31,35,42,47

Deze variant heeft pleomorfe cellen van variabele grootte en vorm,52 en er kunnen grote bizarre multinucleaire cellen worden waargenomen.7,31 De cellen hebben overvloedig eosinofiel cytoplasma dat er glazig of schuimig uit kan zien. Enkele cellen hebben intracytoplasmatisch duidelijke vette vacuolen.31,52 De kernen vertonen ook variabiliteit in grootte, vorm en chromatinepatroon. Nucleair hyperchromatisme komt vaak voor, en enkele of meerdere opvallende nucleoli kunnen worden waargenomen.7,52 Mitoses komen vaak voor.7,22,52 Deze tumor bootst andere pleomorfe mesenchymale maligniteiten na, vooral wanneer ze weinig lipoblasten hebben.67 Liposarcomen lijken op een pleomorfe variant van histiocytair sarcoom, maar in het geval van liposarcomen ontbreken een aanzienlijk collageenhoudend stroma en een spindelcelpopulatie.1,7,22,31,42,52,59 In tegenstelling tot histiocytair sarcoom, vertonen pleomorfe liposarcomen focale labeling voor S100 proteïne in hun lipoblastische elementen.5 Hoewel er in de diergeneeskundige literatuur veel niet-geclassificeerde liposarcomen voorkomen, was dit in een studie met 56 meldingen van liposarcomen bij honden het meest voorkomende subtype.3 In tabel 1 wordt een overzicht gegeven van de liposarcomen die in de diergeneeskundige literatuur zijn beschreven, inclusief informatie over diersoort, leeftijd, geslacht, plaats van de tumor en het voorkomen van metastasering.

Met betrekking tot de diagnose kunnen weke delen sarcomen met een pleomorfe histologische verschijningsvorm vergelijkbare immunoreactiviteitspatronen vertonen.16 Niettemin is immunohistochemische karakterisering van de tumor nuttig voor de definitieve diagnose.42 De aanwezigheid van vacuümcellen met positieve vimentine- en S100-immunokleuring is suggestief voor een liposarcoom.1,16,42,59,65 Alle pleomorfe dedifferentiated liposarcomen zijn intens vimentine-positief,1,59,65 ongeveer 70% is S100-positief, en slechts 30% van hen is collageen type IV-positief. Diagnostische intracytoplasmatische vetvacuolen zijn meestal aanwezig, maar slechts in een klein percentage van de cellen.22,59 Het ontbreken van cytokeratine-labeling is nuttig om liposarcomen te onderscheiden van andere lipiderijke neoplasieën, zoals mesotheliomen.16,42

De in de literatuur besproken histologische kleuring van veterinaire liposarcomen omvat olierood O,7,9,12,14,16,18,29,30,45,46,49,52,66 periodiek zuur-Schiff,1,34 osmiumtetroxide,18,45,52 alcianblauw, en toluidine.17,45 De meest gebruikte immunohistochemische markers waren vimentine,1,14,16,42,43,47,59,52,65 S100,1,16,42,47,59,65 cytokeratine,1,16,42,43,47,50,52,59,65 CD3,51 actine,14,51,65 en desmin.42,47,66

Liposarcomen kunnen cytologisch worden gediagnosticeerd door middel van een fijne-naaldaspiratie, waarbij dichte aggregaten van mesenchymale cellen met een variabele hoeveelheid lipide vacuolen kunnen worden herkend.4,20,35 Er kunnen gemultinucleerde cellen aanwezig zijn.35,44 Andere auteurs daarentegen achten cytologisch onderzoek niet geschikt om tot een definitieve diagnose van liposarcomen te komen, en beperken deze techniek tot ondersteuning van de keuze tussen incisie- of excisiebiopsie.58 Sommige studies suggereren dat de kleuring met olierood O een gemakkelijk, goedkoop en nuttig diagnostisch hulpmiddel kan zijn voor de cytologische diagnose van liposarcomen bij de hond en de differentiatie van andere mesenchymale neoplasmen,33 zoals fibrosarcomen, ongedifferentieerde sarcomen en anaplastische carcinomen.44

De eerste keuze van behandeling voor mens en dier is een brede chirurgische excisie, de huidige gevestigde behandeling voor weke delen sarcomen.26 Hoewel in sommige contexten in combinatie gebruikt om recidief onder controle te houden,7 blijft de werkzaamheid van bestralingstherapie en chemotherapie op dit moment onzeker.26

De auteurs danken Agència de Salut Pública de Catalunya (ASPC), de veterinaire vleesinspecteurs van slachthuizen voor macroscopische foto’s en casusbeschrijving, en de technische assistentie van Blanca Pérez en Aida Neira van de Veterinaire Pathologische Diagnostische Dienst (SDPV-UAB). De auteurs danken ook het Slachthuis Ondersteuningsnetwerk (Servei de Suport a Escorxadors, SESC-CReSA), dat wordt gefinancierd door ASPC van het Departament de Salut, Generalitat de Catalunya.